**省****一立項(xiàng)在研市級課題《miR-130b-3p通過靶向調(diào)控SMAD4在代謝相關(guān)脂肪性肝病中的作用》需要進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)及miRNA的檢測，為完成該項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)部分，現(xiàn)提出面向社會進(jìn)行公開招標(biāo)一家有資質(zhì)的科研機(jī)構(gòu)提供科研服務(wù)，各投標(biāo)單位投標(biāo)前可自行到****行政樓9樓了解相關(guān)要求。****公司不足三家，現(xiàn)重新發(fā)布公告歡迎符合條件的科研單位參與，請?jiān)诠嫫趦?nèi)將相關(guān)材料送至科教科報(bào)名，逾期不接受報(bào)名，特此公告。

一、科研項(xiàng)目名稱：miR-130b-3p通過靶向調(diào)控SMAD4在代謝相關(guān)脂肪性肝病中的作用

科研項(xiàng)目編號：****

二、具體實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

1、檢測實(shí)驗(yàn)組（非酒精性脂肪性肝炎10-20例）與對照組（正常人10-20例）血清（由本院提供），用qRT-PCR 檢測血清中miR-130b-3p的表達(dá)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；

2、采用甘油三酸酯定量比色/熒光試劑盒和總膽固醇和膽甾醇酯比色/熒光試劑盒(BioVision)根據(jù)制造商的說明對血清的脂質(zhì)行定量檢測。

3、miR-130b-3p、smad4 在脂肪肝動物模型（6只）中及正常對照組（6只）中的表達(dá)及其敲除或過表達(dá)miR-130b-3p對甘油三酯含量、脂質(zhì)攝取、肝組織病理情況的影響。

a）構(gòu)建脂肪肝動物模型，HE染色觀察小鼠肝組織，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜆?gòu)建成功與否

b）qRT-PCR 檢測 miR-130b-3p、SAMD4 在非酒精脂肪肝小鼠以及正常對照組血清中的表達(dá)。

c）敲除或過表達(dá)miR-130b-3p后，采用甘油三酸酯定量比色/熒光試劑盒和總膽固醇和膽甾醇酯比色/熒光試劑盒(BioVision)根據(jù)制造商的說明對血清和肝臟組織中的脂質(zhì)行定量檢測。

4、考察miR-130b-3p 過表達(dá)或者敲除對脂肪肝細(xì)胞模型的影響

a）采用0.1mM棕櫚酸鹽和肝細(xì)胞共孵育24h，構(gòu)建構(gòu)建脂肪肝細(xì)胞模型。

b） 檢測miR-130b-3p以及SAMD4在脂肪肝細(xì)胞模型及其正常細(xì)胞對照中的標(biāo)的情況

c）雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 miR-130b-3p與SAMD4 的靶向結(jié)合

d）構(gòu)建 miR-130b-3p過表達(dá)或者敲除質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染入細(xì)胞，PCR檢測miR-130b-3p以及SAMD4表達(dá)情況，油紅染色檢測脂質(zhì)攝取情況，western blot檢測肝細(xì) 胞中脂肪甘油三酯脂酶水平

4、考察miR-130b-3p 通過靶向下調(diào) SMAD4 在脂肪肝中的作用

將 miR-130b-3p 過表達(dá)質(zhì)粒以及 SAMD4 過表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，統(tǒng)計(jì)分析miR-130b-3p 抑制脂質(zhì)積累的作用有無被逆轉(zhuǎn)。油紅染色檢測脂質(zhì)攝取情況， western blot檢測肝細(xì)胞中脂肪甘油三酯脂酶水平。

三、投標(biāo)公司要求

1、滿足《****政府采購法》第二十二條規(guī)定；

2、本項(xiàng)目的特定資格要求：

（1）申請人須提供營業(yè)執(zhí)照、組織機(jī)構(gòu)代碼證、稅務(wù)登記證或三證合一（提供復(fù)印件加蓋公章）

（2）申請人必須提供法人身份證復(fù)印件或法人授權(quán)委托書、被授權(quán)人身份證；

（3）申請人必須提供投標(biāo)方信用中國網(wǎng)站截圖的征信記錄；

（4）申請人必須提供售后服務(wù)承諾。

四、中標(biāo)方式：低價(jià)中標(biāo)

五、報(bào)名時(shí)間、方式及聯(lián)系電話

六、公告時(shí)間：2023年9月26-10月7日

七、報(bào)名地點(diǎn)：**省**市**區(qū)北城雙洋西路8號****行政樓九樓科教科

八、招標(biāo)方式

1、報(bào)名方式：2023年10月7日17:30前將投標(biāo)材料郵寄至報(bào)名地點(diǎn)，逾期送達(dá)的報(bào)名材料，將予以拒收。

2、招標(biāo)時(shí)間、地點(diǎn)

開標(biāo)時(shí)間：2023年10月8日下午15:00

開標(biāo)地點(diǎn)：****行政樓9樓901會議室

3、最高限價(jià)：4.18萬元（人民幣）

4、中標(biāo)方式：院內(nèi)詢價(jià)，最低價(jià)中標(biāo)

5、聯(lián)系人：陳女士 聯(lián)系電話：0597-****282

6、開標(biāo)說明：醫(yī)院組織評委進(jìn)行開標(biāo)，現(xiàn)場拆封投標(biāo)材料，監(jiān)察室全程監(jiān)督，投標(biāo)人無需到場。

科教科

2023年9月26日